總氮是指水體中亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮、無機(jī)銨鹽、溶解態(tài)氨及大部分有機(jī)含氮化合物的總和。水體中氮含量的增加會(huì)造成水生生物和微生物的大量繁殖，消耗水中的溶解氧，使水體質(zhì)量惡化?？偟潜碚魉蛩|(zhì)的重要指標(biāo)之一，總氮測量結(jié)果的不確定度是評(píng)價(jià)總氮測量準(zhǔn)確性的關(guān)鍵指標(biāo)。不確定度，是表征合理地賦予被測量值的分散性與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。在測量結(jié)果的完整表示中除了被測量結(jié)果的最佳估值外，還應(yīng)包括測量不確定度。通過對(duì)紫外分光光度法測定水樣中總氮的不確定度進(jìn)行評(píng)定，查找影響不確定度的主要來源，通過對(duì)過硫酸鉀殘留量、比色液酸度等對(duì)總氮測定不確定度的影響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，明確主要影響因素，降低測定不確定度。

1、測定原理

在60℃以上堿性水溶液中，過硫酸鉀可分解產(chǎn)生硫酸氫鉀和原子態(tài)氧，分解出的原子態(tài)氧在120～124℃條件下，可使水樣中NO2-、NH4-、有機(jī)氮氧化為硝酸鹽氮。消解后的溶液用紫外分光光度計(jì)于220nm和275nm下測得吸光度值，然后根據(jù)校正公式:As=A220-2A275求出校正吸光度As，并按照As與相應(yīng)的濃度繪制校準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣品中總氮的含量。含氮量小于4mg/L時(shí)，硝酸鹽氮濃度與吸光度符合比耳定律。

2、檢測儀器及試劑

2.1、檢測儀器：總氮快速檢測儀

2.2、試劑：標(biāo)配預(yù)制試劑　MI-TN-A

3、不確定度的影響因素分析

經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，吸光度引起的不確定分量Uy最大，其中實(shí)驗(yàn)點(diǎn)相對(duì)回歸直線的分散性引起的不確定度分量Uy1和測量重復(fù)性引起的不確定度分量Uy4對(duì)總不確定度貢獻(xiàn)最大，其他分量的貢獻(xiàn)相對(duì)較小。影響Uy1和Uy4值的因素是分光光度計(jì)的測量準(zhǔn)確度，而儀器的測量準(zhǔn)確度主要影響因素是:雜散光、透射比誤差和波長誤差。對(duì)總氮測量來說，測量波長為220nm，處于儀器光源的邊緣波長范圍，單色器的透射率、光源光強(qiáng)和接收器的靈敏度都是比較低的，這時(shí)雜散光影響就更為明顯。雜散光與吸光度誤差的關(guān)系可由下式表示:

當(dāng)透射比誤差和雜散光強(qiáng)度一定時(shí)，吸光度誤差ΔA隨著測量吸光度A0增大而增大。當(dāng)空白試驗(yàn)吸光值偏大時(shí)，測量吸光度也增大，吸光度誤差亦會(huì)增大，導(dǎo)致測量的準(zhǔn)確度下降，因此總氮的國標(biāo)檢測方法(GB11894—1989)就嚴(yán)格規(guī)定了空白試驗(yàn)吸光值不得超過0.03。為了進(jìn)一步明確空白試驗(yàn)吸光值偏大造成實(shí)驗(yàn)點(diǎn)。

3.1、過硫酸鉀殘留量的影響

根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理，在堿性條件下高溫消解時(shí)，過硫酸鉀分解出原子態(tài)氧、氫離子、硫酸根和鉀離子，氫離子與氫氧根立即反應(yīng)生成水，促使分解過程趨于完全，其方程式為:

K2S2O8+H2O→2H++2SO24-+2K++1/2O2↑(3)

如果反應(yīng)過程出現(xiàn)溫度、堿性環(huán)境達(dá)不到要求時(shí)，未反應(yīng)的過硫酸鉀就會(huì)殘留在比色液中。為了研究不同過硫酸鉀殘留濃度對(duì)吸光值的影響，配制系列不同濃度過硫酸鉀溶液，分別在220nm和275nm波長處測定吸光度。

過硫酸鉀在220nm處有強(qiáng)烈的吸收峰，與總氮的吸收波長重合，這種吸收特性隨過硫酸鉀含量的不斷降低而逐漸減弱。

3.2、比色液pH的影響

根據(jù)檢測步驟，比色液在測量吸光度前要加入一定量的鹽酸。鹽酸的作用主要是中和比色液中過量的氫氧化鈉，以及消除HCO3-、CO23-的影響，因?yàn)镠CO3-、CO23-在紫外區(qū)也有吸收。鹽酸使用量與下面兩個(gè)方面有關(guān):

a)比色液中OH-剩余量。根據(jù)反應(yīng)式(3)、(4)當(dāng)消解完畢后，剩余OH-為0.227×10-3mol，需要消耗1∶9的鹽酸0.2mL。

b)比色液中的HCO3-、CO23-。由于實(shí)驗(yàn)中有純水稀釋，比色液中存在一定量的HCO3-、CO23-，對(duì)比色造成影響，加入鹽酸后，當(dāng)pH小于8.3時(shí)，CO23-轉(zhuǎn)化為HCO3-，當(dāng)pH小于4.3時(shí)，HCO3-、CO23-全部轉(zhuǎn)換為CO。因此，鹽酸使用量要使比色液pH控制在4.3以下。為了研究不同pH值對(duì)空白的影響，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)不同pH值的比色液，分別在220nm和275nm波長處測定吸光度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出當(dāng)比色液pH值在2.0以下時(shí)才有較小的空白試驗(yàn)吸光值。

3.3、實(shí)驗(yàn)用水的影響

按GB11894—1989標(biāo)準(zhǔn)，在實(shí)驗(yàn)條件均相同的情況下分析3種試驗(yàn)用水消解液空白值:①新鮮蒸餾水，電導(dǎo)率為4.39μS/cm;②無氨水，電導(dǎo)率為2.21μS/cm;③超純水儀制作純水，電導(dǎo)率為0.21μS/cm。根據(jù)測定結(jié)果發(fā)現(xiàn)超純水的空白值最小，為0.013;無氨水為0.031;蒸餾水為0.045，因此為了降低總氮測定的不確定度，建議用純度較高的水，如超純水，同時(shí)使用前先測定電導(dǎo)率，當(dāng)電導(dǎo)率低于0.20μS/cm才能使用。

3.4、過硫酸鉀純度的影響

取3種過硫酸鉀:①某廠生產(chǎn)AR級(jí)過硫酸鉀A;②A經(jīng)過1次重結(jié)晶過硫酸鉀B;③A經(jīng)過2次重結(jié)晶過硫酸鉀C。重結(jié)晶方法:燒杯做容器，在55℃水浴中將80g過硫酸鉀溶于1000mL超純水中，將燒杯放到冰水中，使其結(jié)晶，用玻璃砂漏斗過濾，55℃下干燥，得過硫酸鉀B，將烘干后的過硫酸鉀再重復(fù)上述步驟1次;得過硫酸鉀C。按GB11894—1989標(biāo)準(zhǔn)，用超純水在實(shí)驗(yàn)條件均相同的情況下分析3種過硫酸鉀消解液空白值，發(fā)現(xiàn)C的空白值最低，僅為0.012，B的空白值為0.036，C的空白值為0.061。因此認(rèn)為過硫酸鉀的純度對(duì)實(shí)驗(yàn)空白影響較大，對(duì)過硫酸鉀進(jìn)行重結(jié)晶，可以顯著降低消解液空白吸光值。

4、結(jié)語

a)紫外分光光度法測量水樣中的總氮不確定度的主要來源是吸光度引起的不確定分量，其中實(shí)驗(yàn)點(diǎn)相對(duì)回歸直線的分散性引起的不確定度分量和測量重復(fù)性引起的不確定度分量對(duì)總不確定度貢獻(xiàn)最大，原因是儀器測量準(zhǔn)確度隨吸光值增大而降低，空白試驗(yàn)吸光值大，降低測量準(zhǔn)確度。

b)影響空白試驗(yàn)吸光值的主要因素是過硫酸鉀的殘留，當(dāng)比色液中過硫酸鉀的濃度大于0.04mg/L時(shí)，測量吸光度偏大。

c)影響空白試驗(yàn)吸光值的另一主要因素是比色液的pH值，當(dāng)比色液pH值大于2.0時(shí)，測量吸光度偏大。實(shí)驗(yàn)用水和過硫酸鉀的純度對(duì)空白值的影響也較大。